冰冻切片的方法
标本的处理：乳腺、子宫等大块组织经取材,组织周边加包埋剂置于组织样品冷冻头,当表面出现白色时表示组织已冻结即可切片。对小组织如肾穿刺的小组织,先取冷冻头(样品头)加少许包埋剂置于速冻,用速冻器稍压平,当出现硬结时即平放小组织,再次置于冷冻组织,这样将小组织垫高,就能快速切出高质量的切片。
染色方法为HE染色法,步骤为:
切片用10%甲醛液固定30s
75%酒精30s
水洗
苏木素溶液染细胞核2—3 min
水洗
1%盐酸酒精分化
水洗
1%氨水液反蓝
水洗
伊红染细胞浆30s或1min
水洗
依次梯度酒精脱水
二甲苯透明一树胶封固。
全自动冰冻切片机切片技巧
各种组织经冻结后,组织的硬度是不一样的,组织切片的速度电不同软的组织切片速度较慢,硬的组织切片速度较快。同时要选择好锋利无缺口的刀锋，调节好防卷板与刀锋的关系,经调节好刀锋的角度。只要技术人员熟练掌握机器的各种部件的作用和性能,认识组织学结构,掌握好各种组织切片的适宜温度,选择好锋利的刀锋,以及调好刀锋的角度,调节好刀锋与防卷板的角度位置,配好固定液、促蓝液、染色液等试剂,染色方法等,就能快速、准确地制作出的冰冻切片。
