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奥林巴斯荧光显微镜的持点

发布时间:2012-06-20   点击次数:1662次

奥林巴斯荧光显微镜的持点

奥林巴斯荧光显微镜是普通显微术的重大发展。它具有独特的优越性。荧光显微术是在黑阅内背景下观察标‘杠的形色图象,有良好的反刘,故观察清楚、方便,易哥:鉴别,眼睛也不员疲劳。由于荧光染色素的浓度极稀(仪1:Iooo00)便能发出明亮的荧光,因此一般油机体众说是无动的,为活体观察,如研究功能器官的过程和细微纠构,某些代谢过程的变化等,提供了广泛的可能性。另外,英光色素染色法比较简轧时间路标木制作客只,特别适于快速工亿如传染病的快速诊断等。

(1)奥林巴斯荧光显微镜可用明视场改暗视场方洗但”—般用睹权场效果较好,因为它产生的现场背景是黑的,图象反衬强,;十;?立没有明视场方便。至于透射荧光还是反射荧光,一般来说,反射荧光应用范围广一以它不仅适用观察普通标刺;,而且还能现察不适明标本。

奥林巴斯荧光显微镜根据激发光波长的特点,荧光显微术可用紫外光或紫蓝光激发。蒙外光的特点在1:i4观察机体组织的自体荧光<如核酸及金刚石等)在组织华工d:中便于区别背景荧光和染色目标的荧光。但陕点是:常常会引起标4;荧光的光致淬灭,标本难以重复观察,并且沙显微摄影发生团难。另外对活体标本有叨显的杀伤作用,对长期从事这项工作人员的暇睛也有伤害。特别是对绝大多数的荧光色素来说,紫外区不是zui大的光谱吸收风因而不能得到先分的激发。而紫蓝光却没有以上—些缺点,但不足的是不能激发组织的自体荧光,因此不适于研究组织的白体荧光结构。对于个别焚光色素,知罗达明R200,可用波长更长的蓝绿光作为激发光为依。

(2)奥林巴斯荧光显微镜所观察的荧光图象,主要以两个指标判断结果,一是形态学特征,二是荧光的亮度。在免疫焚光工作巾,尤其是这样,必须将两者结合起来综合判断不可偏皮。纠果记录是根据主观指标或客观指标,但一般常是凭工作者日力观察的主观指标由于这是定性的观察,所以记录的度较差。随着科学校木的发展,采用客观指标记录结果巳开始应用。

1、用不同序度的中性滤片‘插入激发滤片和标本之间的光路中,以看焚光减驹的极度;

2、不同标本以相同的陨光时间进行显檄摄影,然后用光密度计测定胶卷图象;

3、直接用荧光计测荧光色素和兔疫荧光染色的镜下标本,

4、用光敏电池漏光表Z;愧网象的亮度,或者与扫描装置结备对视场的特定部位进行扫描等,如荧光显微光度计。

奥林巴斯荧光显微镜对于观察透明度差的标本,以及各种活体组织时,需采用反射光荧光装置。其反射光荧光装置的特点是:从光源来的混合光射到干涉分光滤镜后,波长短的部分(荣外和紫蓝)由于滤镜上镀膜的性质而反射,当滤镜对向光源呈45。倾斜时,则垂直射向物镜,’经物镜射向标久使标本受到激发,这时物镇直接起看聚光器的作用,同时波长氏的部分(绿、黄、红等)能透过滤镜比因此不向物镜方向反射,滤镜起到了激发滤板的作用,由于标本的荧光是处在可见光长波区;故对滤镜也是可以透过的,因此能透射到目镜以供观察。根拇所需要激发光不同,干涉分光滥镜可以更换。

备注:奥林巴斯荧光显微镜的持点部分文章由http://www.cnnoptics.com/,编辑上传。

 

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