徕卡荧光显微镜的正确使用
徕卡荧光显微镜需要在爬宜内进行观氏否则围有其他光线而影响观察的正确性。
徕卡荧光显微镜的产生是由于某些物质核辐射线波长较短的光线照射后即发出波长较长的可见儿有的物质或细胞本身并不产生荧光,但在有机3E光色紫溴润下即能产生荣光。
徕卡荧光显微镜观察方法可分为两种:
(1)陆视场照明法
将紫外光照明器前面的全部滤光片用上,这时汞气灯所发射的全部可见光被滤九而蹬过的紫外九其波长约为3000人一s600A此乃正常的荧光观察法。
(2)深蓝视场照明法
徕卡荧光显微镜将靠近紫外光照明器光源的两组滤光片用2,这时把汞气灯发生的光波限制征一定的波长内(3000A一4500A),视场内有深蓝色的背景出现,是为求得足够强度的紫外光照明标本。
徕卡荧光显微镜为了使照明标本的紫外光线不进入观察看的眼睛,以免损坏眼睛和影响荧光观察的正确性起见在物镐与目镜之间安装有两组滤光片,并可配合组成各种颜色,使用时极为方便.
在使用徕卡荧光显微镜叭皮把定距尺安装在紫外光照明器与显微镜之间,以保持照明器的正确位置。
徕卡荧光显微镜也可安装白识灯照明器,灯泡为6Y15w之白识灯,其插头皮与变压器上白炽灯头插座相连接。
徕卡显微镜作荧光观察时,标本所用的载物比采用石英裁物小当无石英载物片时,亦可采用普通玻璃裁物片,因普通玻璃对较长波段之紫外光吸收并不多。
徕卡荧光显微镜的高压汞气灯一经熄灭,要等到汞气灯冷6g后才可重新发光因而在进行连续观察分桥时,不应中途灭灯,以免浪费时间。策外光照明器必须通过变压33才能使用。’
徕卡荧光显微镜的光源装置
光源装置是徕卡荧光显微镜的主要部分,它的作用是提供足够强度的激发光,现代俊光显微镜基本上采用超高压汞奴光源装置,它由电源箱印灯空两部分组成。超高压汞灯的发光,是电极间放电使水银分子在不断解离和还原过程中发出量子的结果,徕卡荧光显微镜具有固定的光谱曲线,在紫外和紫蓝部分都有很强的发射,足以激发各类荧光物质,这是它被普通采用作为荧光显微镜光源的主要原因。一般都采用200W的超高压汞灯作光涌,其使用平均寿命约200小时左右。
徕卡荧光显微镜由于超高压汞灯的电压很高(纫EoDOV),另外贸外线也很酞因A,灯泡装置在灯室中的后5,以肪伤害眼贿.
徕卡荧光显微镜城色系统
滤色系统是徕卡荧光显微镜的重要部分,它由激发滤片(*相片)和抑制滤片(第二滤只)所组成。前者提供一定波长范目的激发光,后者提供相应波长范围的荧光。其蹈片通常用有色玻璃组成。其型号各国均不相同。
徕卡荧光显微镜激发滤片根据光源和荧光色突的特点,可分为露外光激发滤片,紫氏光激发滤片和紫外蓝光激发滤片。
徕卡荧光显微镜援外激发滤序可随波长400微米以下的紫外光透过,400毫微米以上的可见光挡住。常用型号为ZWBl或zwB3,外加一块BG38以除去ZWBl或zWE3的红色尾波。
徕卡荧光显微镜紫族色激发财挪服波长350一390微米范围内的光透过。常用型号为QB24。紫外政光激发滤片可控波长300一450微米范围内的光逮过。常用型号为ZE2或zB3,外加HG38,韦·些荧光色素,其zui大吸收峰在500微米以上酌.也可以用论绿滤J4BG7激发。近轻改随着金属镀膜陵木的发展,巴开始采用选择性更强的金属膜干涉滤片,由于它调对性强,波长适当,因而激发效果比有色玻璃片更好。
徕卡荧光显微镜所需激发滤片的厚度,主要根据所用显微木激发方式而定,暗场荧光显微术要求激发滤片薄一些,明场时则要求厚一生因为使用暗场时,激发光不理按进入物镜,另外还得考虑标本情况和目的性,基本原则是以获得昆明亮的荧光相的背景衬托为准。
徕卡荧光显微镜抑制滤片的选择,主要根据激发滤只而定。其原则是以*吸收激发光为晚即与激发明计重叠应该;下透过任何可见光(*互补)以保护眼睛不受紫外光的刺激和损害。为与激发滤片相对应,抑制滤片也可分为:紫外光抑制滤片、紫蓝光抑制滤片和紫外验光抑制滤址。
徕卡荧光显微镜的本体
显微镜是任何徕卡荧光显微镜的基本工具,它的主要作用是使被捡标本图象得到不同程度的放大。在荧光显微木中,荧光光源装置是提供一定波长的激发光使被校标本受激发射荧光,再通过显微镜的物镜,B镜系统使荧光图象放大以供观察,因此,一般来说,任何显微镜都可以用于荧企显微术。不玖由于荧光显檄镜所放大的象是荧光图象,必须根据荧光产生和表现的特点,因此在使用方法—L略有讲灾。
一船徕卡荧光显微镜的光学元件,大都果用普通光学玻璃制造。它们对30ooA以上的长波紫外线和可见光能很好地透过,因此完满足——殷荧光显微术的要求,只是在个别情况下,当标本必须用短波紫外线激发时,才需用石英玻璃或特种玻璃的聚光镜和反射执这时残破片也必须是特制晰但在进射光显檄术时,物镜和目镜只需用普通光学玻璃即可。如在反射光显微术时,则物镜必须能透过紫外光的。现就荧光显微木的特点,介绍一下荧光显微境备部分的性能特点。
备注:徕卡荧光显微镜的使用方法部分新闻由http://www.cnnoptics.com/,编辑上传。