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生物显微镜-形态学测量指标与方法

发布时间:2012-02-25   点击次数:1841次

生物显微镜-形态学测量指标与方法

1.灰度(sreylevel>:指图像各种颜色的深浅程度。目前的图像分析仪可将灰度分为256级,如免疫组织化学标本的生物显微镜显微图像上反应产物的染色深浅即可用灰度来表示,能将一张标本上不同染色深度区分成为256级,这是肉眼所不及的。因此,某些实验的结果,如果用光学显微镜作一般的观察,似乎实验组与对照组无明显差异,而用显微图像分析系统经统计学分析,则可反映出显著性差异,这说明仅仅用显微镜观察是不够的。

由于免疫反应产物在细胞内不一定是均匀分布的,在同一个细胞中就可产生各种灰度,这种情况如何进行比较?有两种方法可供选用:一种方法是测每个细胞的平均灰度,另一种方法是在反应产物不均匀的细胞中可用每一种灰度所占的百分率来表示。例如要观察1000个细胞,在这些细胞中各种灰度所占的百分率可测出,并作出曲线,或用其他统计学方法处理,进行比较。

有些生物显微镜显微图像分析系统中带有光密度计组件,光密度计能将扫描器视频信号变换成对应数值,然后数值化,就能用光密度单位来校正。因此,光密度计把被测物的积分光密度作为主要输出,所谓积分光密度即各个单独探测的像素密度分布的总和。因为容易得到被测物的面积,也就很容易求出平均密度。光密度在组织化学反应的定量领域内极为有用。灰度是—•种相对值,而光密度是值。在文献中光密度常用oD(opticaldensity)表示。

2.长度:形状不规则的线形组织结构,一般方法很难计算出其长度,如组织中的毛细血管、神经纤维、细胞超微结构中的各种膜性结构等,以往常用排列稀疏或稠密等词描述,显微图像分析系统则可测出各种图像的周界线长度。

3.面积:无论是在光镜或电镜下观察的标本,都要涉及有关标本中某些结构的面积问题。即使是极不规则的结构,用生物显微镜显微图像分析系统也能算出其面积。在一定的放大倍数下,可以测出每2P“中含多少像素,因此画出待测结构的轮廓,在所勾画的范围内含多少像素是立即可显示出来的,这样,很快可算出面积的数值。

 

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