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徕卡显微镜-显微图像分析系统的工作程序

发布时间:2012-02-24   点击次数:2067次

徕卡显微镜-显微图像分析系统的工作程序

1.标本成像:慢慢移动标本,使需要被观察的部位能在显微镜上得到适当放大的图像。

2.图像获取;鼠标点击打开显微图像分析系统的功能,以进行图像采集与获取。

3.检测:徕卡显微镜在图像分析过程中设法从图像中确定并且分离出需要分析的指标相。“相”是图像中要测量的部分的总称。在检测过程中要使用图像框(im,印frame)和测量框(measurementframe)。检测只在图像框内进行,框的大小按需要而定,测量框在图像之内,是进行测量的部位。两个框之间的部分称为保险区。图像中每个被测物部有其特有的特征计算点(feaurecountpoint,FCP),FCP在被测物的zui低点,如图1,13中上面lo个被测物的FcF均在测量框内,可计数或作其他测量,而zui下面2个被测物的FcP不在测量框内,则不计在内,在测其他区域时再计算,有的被测物可能被测量框截断,那么测量框外的那部分被测物应该位于保险区,即保险区要大于被测物,才能观察FcP是否在测量框内而决定取舍。这样当换到相邻的区域进行测量时,不会使莱图形重复测量,可避免测量误差。图1—14显示放置标本的显微镜镜台的移动方式,可由计算机控制,用编制好的程序,使镜台按一定方式移动,也对以人工操作。图中可以看出每个部他都将通过测量框,不会遗漏。

4.阴影校正;徕卡显微镜校正图像细节直到正确无误并达到朗被测量的要求。所谓阴影是指肉眼看来是均匀的视场内存在着不均匀的电子反应,这使得灰度相同的图像成分由于在视场中所处位置不同而显示出不同的灰皮,这种影响必须校正才能使图像得到准确测量。阴影有三个主要的来源:图像源的不均匀光照、穿过透镜时光路发生变化引起的透镜明影和显像管本身的图像灵敏度差异引起的扫描阴影。任何图像分析在具体运用中都有这些阴影存在,前二者可通过安装精密图像分析仪来控制,后者可通过对显像管的质量严格筛选来减少影响。阴影可贮存起来,并且在每次扫描时同步地从图像信号中去掉。

总之,经过以上各测量步骤后,可以用徕卡显微镜图像分析仪对图像进行测量以取得所需的参数,如灰度、面积、长度、个数等。原始的参数可由计算机转化成容易理解的数值,例如面积可内某图形所占像素数转化为平方微米,使观察者容易理解。

 

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