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生物显微镜的使用(下)

发布时间:2011-12-08   点击次数:1502次

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生物显微镜的使用(下)

(三)反射镜、费光器的使用方法和对光方法

1.调光

对采用反射镜的显微镜,一般都使用平面反射镜去反射太阳的散射光。只有在光线不足或窗外有干扰时,才使用凹面反射镜。采用电光源的显微镜,将光亮调合适即可c

2.聚光器的用法

(1)聚光器高度的调节。

一般的聚光镜.在平行光照射的情况下,其焦点落在它上端透镜平面中心上方约1.25mm线。当使用高倍镜或油镜时,内于放大率大,镜像亮度小,需要较强的照明。因此,应把聚光器升至zui高,以便使聚光镜的焦点正好落在标本平面亡。侗在使用低倍物镜时,可将聚光器适当下降。

(2)可变光阑的用法。

可变光栏起两个作用。一是控制射向标本的光通量;二是改变聚光器的数值孔径。在这两个作用中,后者是主要的。为了使物镜的分辨率得到充分的利用,从原则上说,聚光器的数值孔径应与物镜的相同。否则,分辨率或清晰度会受影响。

3.对光方法

对电光源显微镜来说,使用时只要将光调节合适的亮度即可,不需要进行对光。但对使用自然光的低档显微镜来说,要想获得良好的观察效果,必须充分利用照明光线。因此,镜检之前应先对光。对光时,将低倍镜旋入光轴,聚光器适当升高,可变光阑开

至zui大。然后,从目镜中观察,同时转动反射镜.直至视场zui明亮、zui清晰为止。如果利用自然光,则应尽量躲避窗框和窗外树枝的干扰。

(四)物镜的正确调焦

对光完成后或调节合适光亮后,升高镜简或降低载物台,将标本玻片夹在移动器即标本夹上,并将欲检查的部分移至载物台通光孔的中央,然后开始调焦。

无论作何种检查,均应从低倍镜开始。调焦时,先用粗动手轮将镜筒下降.使低倍镜的前透镜与盖玻片之间的距离略小于该物镜的丁作距离(5mm以下)。为了避免物镜压在标本玻片上,可从侧面窥视。然后,一边从目镜中观察视野,一边利用粗动手轮将镜筒徐徐上升,待初见物像后.改用微动手轮作精细调焦,直至物像zui清晰为止。低倍物镜的视场大,有利于观察标本的全貌。也可利用移动器或纵、横向调节手轮寻觅所观察的目标。如有必要,可将寻得的目标移至视场的中心,为高倍镜观察做好准备。

从低倍物镜转换为高倍物镜时,如果物镜是显微镜的原配,所用的载玻片、盖玻片又符合标准,一般都可以进行“等高转换”。即转换后,只要稍微调节一下微调旋钮.即可看到清晰的图像。但油镜不强求齐焦,先将镜筒升高后再转换,zui后按低倍镜的调焦方法重新调焦。

使用油镜的方法如下:先将镜筒升高,取下标本玻片,稍稍降低聚光器,并在聚光器的镜头上滴两滴香柏油(油小不应有气泡。如有,可用小木签扎破),再将标本玻片放回原处,把聚光器升高,使载玻片的底面与香柏油接触。这样,就完成了聚光镜的伯浸。接着,在盖玻片上滴上1滴香柏油。然后从侧面窥视.利用粗调使镜筒尽量下降,直至油镜的前透镜浸没在香柏油中(但尚未接触玻片)。这样,又完成了物镜的油浸。然后,一边从臼镜中观察.一边利用微动手轮将镜筒缓缓上升(注意不要拧错了方向,压碎盖玻片).直至视野中出现zui清晰的物像为止。

聚光镜的油浸,还可以采用另一种滴油方法,即不直接把油滴在聚光器的镜头上,而是把载玻片翻过来,将油滴在载玻片的底面上,然后再翻过去,对准放置于聚光器上面,再使聚光器上升,来完成聚光器的油浸。这种方法虽然不那么顺手,但比较安全。有人使用玻璃棒直接与聚光镜接触来涂抹香柏油.这种方法容易划伤镜片,不宜采用。

在使用油镜时,允许在聚光镜与标本之间不加香柏油,即聚光镜上仍以空气为介质,但这会牺牲物镜的分辨率。

如用油镜观察后,又需要转回高信物镜观察,应将盖玻片上的油擦去,以免站污高倍物镜。但聚光器广的油可以石擦,只要把光阑适当缩小一点即可。

油镜使用完毕,要及时将香柏油擦拭干净。镜头上可先用干净的擦镜纸擦I—2次,把大部分的油擦掉。然后用二四苯滴湿的擦镜纸擦2次,zui后用擦镜纸擦干净即可。聚光镜的擦拭方法与此相同。如标本需要保存,玻片上的香柏油可用“拉纸法”擦拭干净。即将擦镜纸覆盖在玻片上,在纸上滴上—滴二甲苯.趁湿将纸条平拖着拄外拉,连续几次即可擦干净。

在整个调焦过程中(尤其是高倍物镜和油镜的调焦),每个动作都要缓慢进行。否则,物像一闪而过,找不到观察的目标。

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