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徕卡激光扫描共聚焦显微镜中扫描和检测装置

发布时间:2013-09-22   点击次数:1155次

徕卡激光扫描共聚焦显微镜中扫描和检测装置

扫描和检测装置是徕卡激光扫描共聚焦显微镜的重要组成部分,它直接关系到仪器的情吸比,分辨率等重要指标。要获得高清晰度、高对比度、高分辨率的图像,必须以光点对所要成橡的样品范围内各点逐点扫描,并通过检测器将信号转化为电脉冲,经放大转换处理形成一个完整的二维图像。

如图2—4所示的尼普科夫(NiPkov)盘就是早期出现的扫描成像技术的一个典型实例。其方法是在一个不透明的圆盘k开一系列矩形小孔,各孔的位置相对于圆盘中心的角,间隔恒定,而半径(r)是以一定比例缩短。圆盘以一定速度旋转从而将完整的被测平面图像分解成顺序扫描点,用光电管检测各图像元素,并驱动氖泡,通过尼普科夫盘的另—部分观察成像。

如今.随着对生物结构的研究和分析的需要,借助高度发达的电子器件控制技术,通过计算机完全可以使扫描和检测装置达到一个很高的性能。

目前,在大部分徕卡激光扫描共聚焦显微镕中被广泛应用的扫描装置主要有两类:台阶扫描和光束扫描,我们也可按此来区别徕卡激光扫描共聚焦显微镜的类型。

一、台阶扫描:是出现较早的扫描方式。其原理是样品相对于光束作移动,—般是以一套由计算机控制的可微调步距的步进电机系统驱动载物台按扫描要求作X轴和Y轴方向移动,而光束沿徕卡显微镜光轴在镜头中心保持固定。这就使得对样品各点进行扫描时.具有无相差的光学持性,简化了zui优色、相差校正设计相光路调整,而且信号总是处于zui强状态,分辨大大提高,特别是在扫描小样品(<5ym)时相对于其它扫描方式尤为突出。即使是在高放大倍数图像时,也能以相同质量妇描整个样品,定量采样时重复性好,观察范围不受目镜视野范围的限制,具有提供高质量图像的潜能。其弱点是扫描时间长,理由1:单次扫描即可建立图像,所以从成像的总体时间k看差距个甚明显。

二、光束扫描:主要有镜扫描,这种方式目前较为普遍,工作时样品保持不动,通过一个检流计控制镜子方向变化运动,使光束可按要求对样品作点或线扫描,其zui大特点是速度快,在对活体的研究方面的扫描方式。但由于光束会对物镜造成偏轴扫描,光学质量受影响,照射区域受限制,信号强度和分辨离减低。

备注:徕卡激光扫描共聚焦显微镜中扫描和检测装置的部分文章由北京中仪光科科技有限公司编辑整理上传。

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