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徕卡共聚焦显微镜中细胞生物学功能

发布时间:2013-09-03   点击次数:986次

徕卡共聚焦显微镜中细胞生物学功能

1.粘附细胞的分选:Meridian公司生产的ultMa型徕卡激光扫描共聚焦显微镜成侣仪是目前世界上*能对粘附细胞进行分选的仪器,而这种不改变细胞周围培养环境、细胞铺展程度相生长状态的分选方式是至关重要的。它有两种方式:一种是灿1ahon方式,另一种是CookieCM小。8方式。

AN川on方式原理是;在特制的培养皿上有两类细胞,一类是未作荧光染色的细胞群,另一类是作荧光染色的细胞群,利用高能激光把染色的细胞群杀死,而把末染色的细胞群保留并且继续培养.这种方式适用于数量较多细胞的分选。

Co‘,k;eCMuinR方式原理是:利用高能量激光:F底部带膜的特制培养皿上在欲选细胞周围切割成八角形,而非选细胞则因在该几何形状之外而被除去,它适用于选择数量较少的突变细胞、转移细胞和杂交瘤细胞。

基于这两种方法,徕卡激光扫描共聚焦显微镜能够做到:⑦总体扫描细胞群;⑦根据细胞

物理和少化特性进行分选;②对以百力分之‘机率发生的突变细胞进行筛选;①不改变

细胞形态、类型和活性而克隆细胞;、员分离细胞亚群以进行定量荧光分析;⑥自动储分细胞位迎,以对待定细胞进行重复测定。

2.激光细胞显微外科及光陷阱技术:激光扫描共聚焦显微镜可将激光作“光子刀”使用,以完成细脑膜瞬间穿孔,线粒体、溶酶体等细胞器烧灼,染色体切割、神经元突起切除等一系列细胞外科于术。

光陷阱(opticnltr,p)技术是利用激光的力学效应,将一个微米级大小的细胞器或其以村6钳制于激光束的焦平面,也可称为光钳。可利用光钳技术来移动拙胞的微小别粘和结构(如染色体、细胞器)、进行细胞融合、机械刺激及细胞骨架弹性测址等。

3.荧光光漂白恢复(FR八P)技术:此技术借助于高强度脉冲式激光照射细胞的某一区域,从而造成该区域荧光分子的光淬火,该区域周围州F淬灭荧光分子将以一定速率向受照区域扩散,用激光扫描共聚焦显微镜可邑接对此扩散速率进行监测.由此揭示细胞结构和各种变化的机制,因而可用以研究细胞骨架构成、核膜结构和大分子组装等。

4.胞间通讯的研究:动物细胞中缝隙连接介导的胞间通讯被认为在细胞增殖和分化中起着非常重要的作用。徕卡激光扫描共聚焦显微镜通过测量细胞缝隙连接介导的分子转移,观察相邻细胞之间的胞间通讯。可用于研先肿瘤启动因子、生长因子以及细胞内物”、pH相cAMP对缝隙连接祁胞间通讯的影响。

5.细胞膜流动性测定:细胞膜荧光探针受到极化光线激发后,其发射光极性依赖于荧光分子的旋转,而这种有序的运动自由度依赖于荧光分子周围的膜流动性,故极性测员叮间接反映细胞膜的流动件。因此,通过专用计算机软件,徕卡激光扫描共聚焦显微镜可对细胞膜的流动性进行定量和定性分析。这种膜流动件测定在膜的磷脂酸织成分析、药物效应和作用位点、温度反应测定及物种比较等方面有重要作用。

备注:徕卡共聚焦显微镜中细胞生物学功能部分文章由北京中仪光科科技有限公司编辑整理上传。

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