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徕卡激光扫描共聚焦显微镜

发布时间:2013-08-06   点击次数:1931次

徕卡激光扫描共聚焦显微镜

值孔径的透镜。此后不久,这项技术在医学和生物学中得到应用。

1979年,凯斯特(Koest曰)设计了一种徕卡共聚焦显微镜,为此他获得了美国。198l年,维纳恩兹•范•雷桑持(W加aed铭vanResnmt)*次成功地演示了用荧光探针标记的生物材料的光学横断面,它标记着所有的关键技术已经成熟。同年,范德•威欧瑞特(vaa』erVoon)全面地描述徕卡激光扫描共聚焦显微镜。他认为一套高质量的重视日常激光扫描共聚焦显微镜必须包括:标准消像差和色差的光学透镜、高灵敏度的探测器、产生特定波长的功率不太小的激光器、高速度大容量的微机系统和扫描控制装置。

早期的徕卡激光扫描共聚焦显微镜采用狭缝扫描,它的待点是扫捆速度较快,适合实时观察动态标本。但是内于显微镜的物镜存在着轴外伤差,并且用狭缝扫描时在平行狭缝e1光轴平面亡没有共聚焦原理,所以得到的共聚焦图像的清晰度和质量都受到影响。另外,由于一般徕卡显微镜存在着紫外色差、所以不可以用紫外光做为荧光激发的光源,但是由于

它的扫描速度快,结构简单,价格便宜,所以还是有一定的使用价值。

为了克服早期徕卡共聚焦显微镜的缺点,后来的采用台阶扫描技术提高成像质量。它的原理是扫描时光栏(用孔光栏代替狭缠)不动,靠移动工作台让物体一点一点被扫描,这样成惊光束永远是轴上的、没有轴外伤差。另外有些仪器上还加了沪紫外色差的切换装此,这种仪器的图像质量相功能比以前有人的改进。随之而来的缺陷也很严重:妇报时必须把标本固定死,以于使它的扫描速度比以前慢得多.所以方法实时地观察活标本。

在使用较多的是光束扫描器,即驱动激光束扛描标本。它具安足够伙的速度,可满足共聚焦系统的要求。光束列描器包括:单光束、多)t束、狭缝扣拟器。单光束们描器性能.狭继掏描器虽具有产生图像的zui高速度.但是与单点扫描器帕比,信噪比较低,这

是由J;从散焦区来的没肘光不能被有效的档住.另外在其分辨率本领厂有内部的不平衡性。多光束扫描器由电动马达带动N1pk‘’v盘旋转而完成。

发展过程来看.成像质量与扫描速度始终是相互矛盾的。各厂家在此方面曾想尽办法努力解决,比如MerEd,an公司推出成镣质垃较高的U比ma如激光扫描共聚焦显微镜祁扫描速度zui快的In,Ight型激光扫描共聚焦显微镜,而Nikon公向则利用自家光学设计的优势.研制出产品“水镜”来代替以柞的物镜,取得较好的结果。公司*家推出共聚焦专用物镜CN.ANAP()CHIMAT40x/1.2w*zui近又推出C—PI‘ANAP()63X/1.2w水镜,该水镜有一调节环,可修正阎水浸活休的不同深度所带来的球差,其紫外通过率南,大大提高了成像质量。zeM公司也是世界r1*家奉公司白行设计的“体视激光扫描共聚焦显微镜,使系统性能达到高度的协调同一。N。—Red公司伞产的激光扣描共聚焦显微镜,出于其产品价廉物美.目前在世界上占有率较高。

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