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生物显微镜微生物污染的检测

发布时间:2012-08-27   点击次数:1613次

生物显微镜微生物污染的检测

污染的潜在来源是多方面的,如来自用具、室内空气、工作台面、组织样品v溶液,以及操作过程等。因此必须尽量小心地去避免它。然而,即使是zui的实验室,也准免不发生污染。因此。要经常进行检测,争取尽早发现,及时排除,防止扩大污染。

建议采用如下步骤检测:

(1)用肉眼或生物显微镜检查各步骤的污染。每2—3个月核查一次支原体(如果是原代培养,则2—3周核查一次)。

(2)如怀疑有污染,但仍不明显,又没有证明,除怀疑的培养物和吸管外,先将工作罩子和工作台面清洁消毒。然后,待所有的培养工作操作步骤结束后,取怀疑培养物样品.摘在载敢片上,在生物显微镜下仔细检查,用位相差显微镜进行检查。如证明有污染,将吸管丢弃,用70%酒精按沈罩子和工作台面,30分钟后再使用。

(3)将污染性质记录在登记卡上。

(4)如果是新的污染,又是局部污染,没有扩散,则将污染培养物、用来接种污染培养物的培养瓶和其他用于此培养的胰蛋白酶瓶子等丢弃到消毒剂中去,在组织培养区外的毒气罩内操作。

(5)如果是新的污染,而且是散播的,即至少在两个不同培养物中均发现有的,应把所有的培养液、母液以及胰蛋白酶等均丢弃。

(6)如果类似污染重复出现.则检测母核是否污染。可采用的检测法:1)单独湿育或在营养肉汤中温育;2)铺在营养琼脂板(Difco)上;3)假如上述两个方法均末检测出来,但仍有怀疑时,则取100m1,通过0.2μm滤膜过滤,然后将滤膜铺在营养琼脂上温育。

(7)如果污染不但广泛散播,又是多品种的,而且重复再现,则需要检查消毒步骤,即烘箱和蒸气消毒锅的温度、消毒时间、包装和贮存方面是否有问题.以及房间消毒和超净

工作台的垂直层流的过滤器是否失效。

(8)不要企图清除污染物的污染,除非它们是*的培养物。清除污染可以:1)用

合有比正常浓度高的抗生素的B5s清洗培养物,清洗5次;2)加抗生素到培养液中,放置48小时。如果可能,可检测污染物对四一种抗生累比较敏感53)除去抗生素。在不加抗生素情况下培养2周,核查污染是否已被清除。

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