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徕卡显微镜-暗视野显微镜的使用

发布时间:2012-04-26   点击次数:1606次

徕卡显微镜-暗视野显微镜的使用

一、目的

了解暗视野显微镜的构造和原理,掌握其使用方法。

二、原理

徕卡显微镜-暗视野显微镜是使用一种特殊的暗视野聚光镜或暗视野聚光器,不让光线直接照射被检物体并进入物镜,而是使光线只能从周缘进入并会聚在被检物体的表面,利用被检物体表面的反射光线来观察物体的轮廓。暗视野显微镜适合于观察在明视野中不易观察的折射,如细菌的运率很强的物体,以及普通明视野显微镜看不到的微小颗粒(0.2—0.04μm)动或鞭毛等。

徕卡显微镜-暗视野显微镜有两种主要类型:一种是折射型,即在普通聚光镜放置滤光片的地方放上一个中心有光挡的小铁环就成为一个暗视野聚光镜。另一种是反射型,有不同形式的产品。

三、材料

1、菌种,枯草芽孢杆菌或大肠杆菌

2、仪器及其他,普通光学显微镜、暗视野聚光器、显微镜灯、盖玻片(厚度1.0—1.2㎜)盖玻片(<0.17㎜)、香柏油、二甲苯、擦镜纸等。

四、方法与步骤

1、安装暗视野聚光器,取下普通聚光器,换上暗视野聚光器,上升聚光器使其透镜顶端与镜台平齐。

2、调节光源,光源宜强,将光源的光圈开到zui大,聚光器光圈调至1.4如显微镜本身不带光源,可用显微镜灯,调整好光源和反光镜,使强光束正好落在反光镜中央并反射入聚光器。

3、制片,取载玻片一块,加一滴幼龄菌液,盖上盖玻片。注意不要有气泡,载玻片和盖玻片应非常清洁,无油脂、无划痕,以免反射光线。

4、置片,加香柏油于聚光器透镜的顶部,下降聚光器,然后把制片放置在载物台上,并把标本移至物镜下,升高聚光器,使镜油与载玻片背面相接触,避免产生气泡。

5、调焦和调中,用低镜进行,调节聚光器的高低,zui初可出现一个中间有一黑点的光环,再调至成为一个光点,光点愈小愈好。然后用聚光镜的调中螺丝进行调节,使光点位于视野的中心,如图1-2.

6、用油镜观察操作方法见实验1.1可进一步微调聚光器和反光镜使暗视野照明处于zui佳状态,并仔细调节粗、细调节螺旋,使菌体更清晰。

五、记录结果

描述所观察菌体的运动情况。

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