徕卡荧光显微镜以良好的光学性能、稳定的激发系统和人性化设计，成为生命科学、病理诊断与材料研究中观察荧光标记样本的核心工具。荧光成像对操作精度要求高，不当使用不仅会降低图像质量，还可能损伤昂贵的滤光片、物镜或光源。掌握
徕卡荧光显微镜正确使用方法，是获取高质量数据、延长使用寿命的关键。
一、使用前准备
环境控制：在暗室或低照度环境中操作，避免杂散光干扰荧光信号；确保电源稳定，接地良好。
样本制备合规：使用抗淬灭封片剂封固，避免气泡；选择与激发/发射波长匹配的荧光染料，并设置阴性对照。
检查耗材状态：确认汞灯或LED光源寿命未超限（汞灯通常200–300小时），滤光块无霉斑、划痕，物镜无油渍或灰尘。
二、开机与光路校准
先开主机，再启光源：尤其使用汞灯时，需预热5–10分钟至光强稳定；LED光源则可即开即用。
明场定位先行：先用透射光（如卤素灯）在低倍物镜下找到目标区域，调焦清晰，避免直接在荧光下盲目搜索导致光漂白。
正确切换荧光通道：通过转盘或电动模块选择对应滤光块，确保激发光波长、二向色镜与发射滤光片三者匹配。切勿在无样本时长时间开启荧光光源。
三、成像操作要点
从低倍到高倍观察：避免高倍物镜（如63×油镜）碰撞玻片；
使用低必要光强与最短曝光时间：通过软件调节光源强度或相机增益，最大限度减少光毒性与荧光淬灭；
油镜使用规范：仅在标有“Oil”的物镜上滴加专用无自发荧光浸油，用后立即用镜头纸蘸少量二甲苯或专用清洁剂擦拭干净。
四、关机与维护
先关荧光光源，再关主机：汞灯需冷却后再断电，防止热冲击缩短寿命；
复位光路：将物镜转至低倍，载物台降至低，关闭光闸；
定期保养：每季度由专业工程师校准光路、清洁内部光路元件，检查快门与滤光轮动作。
