徕卡共聚焦显微镜基本原理
一、徕卡共聚焦显微镜
由于具有光学切片性质.徕卡共聚焦显微镜特别有列于牧厚物体的三维成像。它7;仅以荧光模式3。泛地应用r各种生物样品的成像,而只以明视野反射模式应用1;不同形状物体的成保。
徕卡共聚焦显微镜中出激光器产;生的激光经物镜聚焦到样品上,所产牛的反射光或荧光通过分光器后经同镜会聚于探测器,在激光扫描共聚熊显微镜小,光电倍增管(或其它)检测器前有一个共聚焦狭缝或小孔,见闻l—1。用会聚光束心物体进行扫描,可以产生相应的图像,通常可存入计算机显像系统。
徕卡共聚焦显微镜是扫描光镜的种持殊的成保模式,由于通过扫描方式成您。因此比普通显微镜有许多优点。
徕卡共聚焦显微镜的优点主要源丁其两个主要性质:
其一图像是以电信号的形式记录;来的,所以可以采用各种模拟的和数字的电子技术进行图像处理。这些常用的图像处理技术有:可显示差异或变化的图像增强技术(如框架平均术,反差增强术,边缘增强木,因像如除术,,可提高分辨率和降低本底的图像修复技术,和图像分析技术(加持征识别.测定细胞的大小和数目)等。
其二在徕卡共聚焦显微镜中,物体经精细调焦的光束照射而成像。这不仅可以使用许多新型的光学成份模式,如共聚焦成像或相差成假,而且也可能用其它成像模式以检测入射光束而产生的‘些相关效应。
当检测光和照射光的波长不同时,这类斤法中有一种特别重要的方法会应运而生。
在徕卡共聚焦显微镜中将引捕技术应用于这种光学成像的优点是,这种成像方法,用入射光操作,不需要选择波长祁分析发射光,因而简化了设计,提高了性能。检测系统也因为不需成保而可以有更高的灵敏度。这对荧光显微镜特别有用,因为其分辨牟取决于较短纳入射波长,而个是较长的荧光波。
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