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徕卡生物显微镜的光学技术参数

更新时间:2013-07-09   点击次数:2478次

徕卡生物显微镜的光学技术参数

 

焦深为焦点深度的简称,即在使用徕卡生物显微镜时,当焦点对准一物体点时,不仅位于该点平面上的各点都可看清楚,而且在此平面上下一定厚度内,也能看得清楚,这个清晰部分的厚度就是焦深。焦深大,可看到被检物体的全层,而焦深小,则只能看到被检物体的一薄层。

1.焦深与总放大倍率及物镜的数值孔径值成反比,放大倍率愈高,数值孔径值愈大,焦深则愈小。

2.焦深对条件的要求恰好与分辨率相反,分辨率高则焦深变小。因此,在使用高倍物镜并求高度分辨率的观察时,由于焦深小,必须运用细调焦装置上下调节,以观察被检物体的全层,弥补焦深小的缺陷。但是,在进行显微照相时,则不能如此,而就当尽量利用焦深大的物镜。如40×物镜,数值孔径有0.65、0.70.0.85.0.95四种类型,观察时,选用NA为0.95的物镜,可得到好的观察效果;而显微照相时,可根据制片情况适当选用NA值小的物镜,才能得到比前者焦深大的效果。

3.被检物体周围介质的折射率加大,可增大焦深。尤其在显微照相时,更应考虑封片剂的使用。

徕卡生物显微镜的焦深即使是大的,实际上数值却是很小的,只能看清楚几个或十几个微米薄层内的物相。

在使用高倍镜进行显微照相时,焦深小时矛盾更为突出。因此,在使用100×的高倍物镜时,可选用带虹彩光阑的物镜,以改变镜口角的大小,从而改变NA值,以调节焦深的大小。

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