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徕卡生物显微镜VS光学显微镜

发布时间:2012-05-16   点击次数:1508次

徕卡生物显微镜VS光学显微镜

光学显微镜中所用的可见光源是波长为400一800nm的电磁波。波传播的特性之一是衍射。衍射就是波遇到障碍物时能偏离直线传播的性质。根据基础物理知识可知,由于实际光学仪器都有限制光束的“窗口”(光学显微镜中的“窗口”就是物镜边缘所限制的透光范围),它造成的衍射效应会使每个物点形成的像都是有所扩展的衍射光斑。靠得太近的像点彼此重登起来,会使画面中的细节变得模糊不清。光学显微镜中还有一些像差(如球差和色差等)也会使像点展宽,但它们大多可以校矫正。所以衍射差就成了限制光学显微镜分辨率的*重要因素。

根据徕卡生物显微镜成像原理可以得出:一个物点所形成的衍射像斑是一种强度大部分(约84%)集中在中心圆斑,而周围伴有强度逐渐减弱的若干离散同心环的衍射花样。中心圆斑(也称A卸因斑)的半径。约为:n、o.6l扇式中A一显微镜像方所用介质中的光波长;久一物镜光闲(即物境“窗口”)对像点所张的半角.亦稼像方物镜孔径角或电子束半张角。光学仪器中通常采用Rayl出gh判据作为分辨率的标准,即当一个囚斑像约中心刚好落在另一相邻圆斑像的边缘上时,这两个俄恰好能被分辨(图1一1)。因此图像上可分辨的zui小距离众就是Airy团斑的半径。。利用介质中的可见光波长入与真空中可见光波长J的关系入=4/q(q是物镜像方所用介质的折射率),以及显微镜物镜两侧有关参数的公式Misin氏=(砌sLn6。)/M(聊是物镜与物之间介质的折射率,gd是物镜光阑对物点所张的半角,灯是显微镜物镑所决定的图像放大倍数),便可以把像上的分辨率品转换成对物方样品的分辨率成,通常被称为显微镜的数值孔径(nu毗icalapenM陀)。

因可见光的波长局限在400nm到800nm之间,故若要缩小可分辨距离久,就必须增大数值孔径。但是为此只能靠提高勒的值,具体做法可以是在载物片与物镜之间加油滴等,但山的zui大值约为L5,zui大张角60约为70‘。而徕卡生物显微镜zui小分辨率极限接近o.2Pm(即200nm)。由于人暇的分辨串约为o.2mm,因此要求光学显微镜的zui高放大倍数也只是1000倍左右。可以更好的看清被检物。以这个性能来衡量,便可得知用光学显微镜看不清真正的细脑膜、细胞器的微结构,也看不见病毒和大分子。

备注:徕卡生物显微镜VS光学显微镜部分由http://www.cnnoptics.com/编辑上传。

 

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