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徕卡显微镜-精子检查

发布时间:2012-04-05   点击次数:3291次

徕卡显微镜-精子检查

一、操作程序简述

1湿法分析包括下列内容:①浊度,②凝集;②精子计数及其活动力评估o

2.活动摆子百分率及其动力学测定①主观方法;②客观方法。徕卡显微镜

3.稿子计数①血细胞计数器;②Msrkler计数池;③计算机辅助的精液分析(con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA)。

4.制备精液读片桔液涂片、精液染色、形态学分析。

在确定精子数量和活动力过程中,无论采用何种技术,对每一个精液样品均需用湿法或“湿操作”.此法将使检验人员对稿于计致、活动情况和有关动力学具有一个初步的主观印象,并可测定浊度和强度;在测定稿子计数及其活动力过程中,温度显得很重要。显然,37°是zui优选择;然而,如缺乏调节温度的显微镜操作台,整个分析过程要在此条件下完成是不可能的。通常.精液分析在室温中进行。正如人们所知.室温变化范围很大,因此,必须尽量控制操作区域的温度。

(一)方法

精液完全液化后,充分混匀,加一滴未稀释桔液于干净玻片上,盖上盖玻片。也可用自动加样器吸lo微升精浓加至载玻上以提高测定的可重复性。在放大200—400倍(高倍镜)的情况下观察20个视野,评价活动稻子的百分率、相对运动速度和方向以及每一高倍视野下的精于数,评价其浊度和是否有凝块,确定“圆形细胞”(未成熟微生物细胞和白细胞)的百分率。

(二)浊度

显然,成熟馆子在精掖中占多数。但有时也会发现其他细胞或碎片。来自男性生殖道的亡皮细胞也会存在于精液中。在高倍镜下,偶尔发现上皮细胞并非病理指征。但息尿道炎的男子其棺液中可出现大量上皮细胞;有时亦可见阴道源性的上皮细胞,这种情况表明俏液样品是经性交中断法收集的.此类细胞应在报告单上注明。徕卡显微镜

不成熟的病原茵细胞和白细胞也常在精液中出现,在染色破片上难以区别,而应用湿法操作法则更不可能。通常用巴氏(Papnicolaou,PAP)染色来观察这种“圆形细胞“(大于或等于成熟稻子的10%);而湿法分析有助于确定哪些样本需用这一方法进一步制备。应对白细胞的确切数目和不成熟病原茵的百分串加以确定和记录(详见后述)。

在精液中,还可能出现其他颗粒性物质如梢肤结晶、滑石粉和杀桔剂颗粒,如发现量很大,则应加以记录。粗大茵体、毛滴虫、念珠菌更应加以报告。

(三)凝集

徕卡显微镜在某些(非全部)含抗精子抗体的桔液样本中,精于可能发生自发性凝集,应在主观判断的基础上加以报告并记录凝集类型和程度,凝集程度的评价用0-Ⅳ表示(表44)。精子凝集方式注明为:头—头、头—尾、尾—尾或混合型。有时出现格子粘附于碎片或其他颗粒性物质的现象,应与真性凝集区别开来。这种现象除非根严重,否则一般不作报告。出现精于凝集提示应作特异性抗精子抗体的检测(见有关章节)。

(四)评估精于数、活动率及其动力学

在精液分析报告中应记录棺子数,避免出现少数、几个、很多、大量馆子等主观性估计。但是,如果每高倍视野观察到大量精子而实际计数所反映数量有所下降,应该怀疑结果的难确性,并重新化验;徕卡显微镜此外,还应对精子活动串(25%、50%、75%或大于80%)和动力学特征(缓樱随意运动和快速直线运动)作出主观评价,并与以客观方法测定的结果相比较。显然这种方法的主观性很强,在测定者之间甚至同一测定者身上易产生差异。然而,这些“主观的粗略分析”常会提示客观分析方法的潜在错误。

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