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继续分享金相显微镜的显微摄影（下）
5．摄影胶卷
（1）摄影胶卷的种类
摄影用的感光胶卷种类很多，以全色黑白软片使用zui普遍，如120、135胶卷都是经常使用的全色黑白片。这种胶卷对波长为3300—7000埃范围内的光均能感光，所以称为全色片，但在5000一5500埃波段（绿光）感光度稍有降低。由于它的感光度强，分辨本高，容易生产和保存，所以使用很普遍。另—种是分色片，对于波长为3300一5800埃波长范围内的光均能感光。此外，经常使用的还有普通彩色片，影调呈彩色，它是用感色性不同纳三种乳剂涂布在基片上而成，经过曝光，显影相成色的加工过程，得到黄、品红、青三种补色，分别记录U标的Z种原色光分解的物象。由于人限辨别彩色影调的能力比辨别黑白影调的能力高100倍，因此，使用彩色胶卷摄影金相照片对金相分析更为有利。
（2）摄影胶卷感光速度
摄影感光胶卷zui重要构特性之一是感光速度。胶卷的光速度简单地说是指胶卷在曝光、冲洗后感光胶卷变黑至适当程度所需要的曝光量。一般来说，感光速度快的底片，感光乳剂中银盐颗粒粗，所需曝光量少，分辨率较低，而已灰雾现象比较严重，物象色调不够明朗，层次减少。感光速发慢的底片，银盐顺粒细小，所需曝光量大，它的分辨本高，物象清晰明朗，层次细节明显，克服了感光速度快的胶片的缺点。
金相显微镜摄影对底片的感光速度要求不高，而对分辨率的要求比较高，因而选用感光速度惺的胶卷为宜。至于曝光时间长的缺点，可由增加光源亮度的方法弥补。
关于照相胶卷的感光速度，各国都有各自的测定标演。一般，数字大的感光速度快，数字小的感光速度慢。国外照相胶卷的外包装盒上常有
等字样，这些数字是各国不同的测定感光度的标志。目前国产的照相底片，是以“GD2l”、“GB24”叫等标志的。为了便于计算，现列出各种常用胶卷感光速度换算表（见表4—1），以供参考。 
（3）使用摄影胶卷的注意事项
使用胶卷时，耍注意下列几点：
1）胶卷的有效年陆每个胶卷念上都印有使用到期年限，如某年某月等。胶卷一过期，感色能力就逐渐减迟，灰雾度增大，物象层次减少，反差降低，甚至使脑膜脱落等。所以，过期胶卷尽量不要使用。当然不是说过期仅几天就不能用了，如果保管特别好，过期几个月还没有发生显著变化的胶卷还是可以用的。
2）防潮防热：胶片zui怕潮湿和高温，因为潮热会使胶片的感光能力减免灰雾度增大。所以存放在干燥、凉爽、黑暗和空气流通的地方。如果存在柜内，应用玻璃缸承放，缸内放入硅胶或氯化钙等吸潮剂。若吸潮剂已变色或已受潮，要及时更换，以保持缸内干燥。
3）防止漏光：先应检查片盒是否有损坏，以免漏光。在暗宝内将胶片装好后用黑布包裹片盒并在有黑布遮盖的情况下装在照相装置上，摄影时也应用黑布盖着。装在片盒里的胶卷，短时间内摄影完。特别在夏色天气湿热，胶片药胶与空气接触久了，容易发灰。
6．底片曝光
显微摄影中将物象投射到照相底片上的过程，称为曝光。照相快门持续张开的时间，称为曝光时间。
曝光是显微摄影中的重要环节，曝光是否准确，决定着照片的质量。即使一切条件都已选择良好，只要曝光发生错误，就会使照片质量显著下降，甚至成为废品。
（1）影响曝光的因素
影响曝光的因素很多，照明光源的亮度引起曝光时间的差别就很大。例如用高亮度的氙灯和弧光灯照明，曝光时间在几分之一秒到几秒之间；用普通钨丝白炽灯照明，曝光时间长达几分钟到十几分钟。物体的特性对曝光的影响也很大，例如粗大的，区别明显的单元所组成的组织，或光亮和鲜明的组织，所需的曝光时间比细小的，暗淡的或对比度差的组织要短一些。此外，照明方式，照明光源电压的稳定性，底片的性能，滤色片的颜色，物镜的数值孔径和放大倍数，摄影目镜的倍数，摄影腔的伸长度等都对曝光产生影响。因此希望利用计算的办法来求得正确的曝光时间是困难的。但是合些条件的变动对曝光的影响有一定规律，这些个别的变动可加以计算校正。现分述如下。
1）物镜孔径与曝光时间的关系
曝光时间与物镜有效数值孔径的平方成反比，参看表4—2。表中的曝光因数是设数值孔径为0.5时，曝光因数为1而得出的。
所谓方效孔径是指实际能利用到的物镜孔径。例如一个数值孔径为0.85的物镜，因为孔径光栏缩小，使它的孔径变小，有效数值孔径就个是0.85了。曝光时间与数值孔径平方成反比的规律，只对同一工厂同一时期生产的物镜才比较避确。不同工厂的产品及同一工厂不同时期的产品，因物镜的结构及透镜镀膜的不同，很难进行比较。
2）物镜倍数与曝光时间的关系
曝光时间与物镜放大倍数的平方成正比，参看表4—3。表中的曝光因数是设10 x物镜的曝光因数为1而得出的。
这个规律对任何物镜都是正确的。但通常物镜倍数增高问，数值孔径也随着增加，因此，曝光时间的增减有抵消的趋势。但由厂放大倍数与数值孔径并不是成比例的增加，有时会相差很大，所以还将要计算。
3）目镜倍数及目镜至底片距离与曝光关系
曝光时间与目镜放大倍数的平方成正比。但不同类型的目镜彼此之间有差别。
目镜至底片的距离就是摄影腔的伸长度。曝光时间与此距离的平方成正比，参看表4—4。表中数据是以目镜到底片距离为25厘米的曝光因数为l而求得的。
（2）曝光时间的确定
由于影响曝光的因素很多，只按某些因素估计出一个准确的曝光时间是不可靠的。即使从投射到毛玻璃上物象的亮度来确定曝光时间，也是容易发生错误的。因此，经常从目显微摄影的工作人员，应当设立一个记录本，详细记录每口拍摄的目标特点，仪器组合，照明条件，性能参数，曝光即问和底片冲洗后的质员，为以后的摄影工作提供依据。要正确测定曝光时间，可以采用下述方法。
试摄法：就是在仪器组合，照明条件摄影目标均相同曝光时间不同的情况下，伯出五条不同的影象，用反复试理法，求出准确限光时间。例如以一分钟左右的曝光时间为宜。则把暗盒的挡光板拉出五分之一曝光两分钟，再把挡光板拉出五分之一曝光—分钟，以后每拉出五分之一曝光一次。招拉三次，而各次顺序眼光30秒、15秒、15秒。这样在—张底片上便能得到4分、2分、 1分、30秒和15秒五级不同的曝光时间。显影后，如看出一分钟至30秒之间zui为适宜，那就将此再分五级，作同样的曝光试验，直至求得zui合适的曝光时间为止。
进行上述试摄陆试摄曝光时间应按几何级数增讯即1、2、。4、8、16、32……等。这样才毙迅速准确地测定曝光时间。在无把握的情况下，可采用1、3、9、27、81…”等倍数曝光。不要用算术级数1、2、3、4……等的曝光倍数，否则只会浪费时间和底片。
用试摄法求出准确曝光时间后，就可进行金相摄影工作。若在拍摄中某些条件发生变化，例如更换物镜、摄影目镜或摄影脾长度改变时，可用上节计算方法增减曝光时间。
曝光表测定对有曝光表附件的金相显微镜，可把摄影装置上的对光玻璃取下，把曝光表的感受部分安装在放置底片的位置上，把显微镜调节在摄影状态，读出曝光表指针位置的数值，然后根据附表换算出准确的曝光时间。这虽是一种简便的方法，但必须在暗室中进行。
若毛玻璃处物象亮度太弱，可将测光表对准物象的明亮部分测定。如果亮度仍太弱，测光表指针不偏转或偏转很少时，可将试样移开，换上普通的玻璃镜子，再测定镜子反光形成的亮视场。由此测得的曝光时间，再适当增加l一2倍就可作为需要的曝光时间。如果这样的亮度仍太弱，测光表指针还是不动，可将表的受光部位逐渐向摄影目镜方向移动，直到测光表指针能目准确定出曝光时间为止。设此时对于f/1.0曝光时间为t，量出测光表受光部位到摄影目镜距离为d，再量出摄影目镜到底片的距离为D，则正确的曝光时间T为
但应注意不要使测光表过分接近目镜。只要目镜射出的成象光束亮团等于测光表的方形（或圆形）受光面积即可停止。因这时全部成象光束已射入阳光表中，如此时指针仍不能偏轮表示成象光束太弱，必须采用更灵敏的测光表进行测量。
（3）防振和清洁
zui后，在金相显微镜摄影中还要注意振动的影响及光学系统的清洁问题。有些微小的振动，虽不明显，但在摄影中却很敏感。任何不稳定或振动发生在曝光时间内，都可使照片质量显著降低。在高、中级型金相显微镜的底座中，都装有防震装置，以便在轻微振动的环境中仍能从事金相摄影。但操作者应经常检查这些装置的可靠性，并应调整到正确的使用位置上。
光学系统表面落有灰尘、油脂、指印或擦伤痕迹，都会降低照片的质量。为此可用吹风球，柔软的小毛扫，搓洗干净的脱脂织麻布把灰尘除去，或用甲苯清洗。
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